蚕病综合防治
蚕病综合防治措施之三: 发现蚕病,正确诊断
在养蚕过程中应加强观察检查,以便及时发现蚕病的征兆,把蚕病消灭于萌芽状态之中。通过对蚕群体及个体活动的状态进行健康诊断,以掌握病情,能及时发现蚕病,做好防治工作。
(一)加强对蚕发育的观察,防止蚕病的发生与蔓延
1、注意观察青头蚕、迟眠蚕 大批蚕群体不容易发现患病的征兆。一般先从发育迟的青头蚕或迟眠蚕中显现出来。农村养蚕生产中,有时把末蚁、各龄的青头蚕、迟眠蚕等混于一匾内饲养。由于这些蚕的体质比较虚弱,再加上管理不当,容易发病,并由此扩散蔓延,造成严重的损失。观察发病的征兆应以这些蚕为重点。青头蚕和迟眠蚕不一定是病蚕,但病蚕都先在青头蚕和迟眠蚕中发现。如果青头蚕、迟眠蚕没有出现发病的征兆,可说明整批蚕比较健康,如这些蚕中已发现病情,应该引起注意,并进一步分析诊断属何病,同时加强对大批蚕进行观察,及时采取措施加以防治。在群体中出现极少数病蚕时,应剥除病蚕并进行蚕体蚕座消毒。如病蚕数量较多时,要隔离、淘汰,并针对蚕病的种类进一步采取有效措施。
2、观察蚕的发育及眠、起状态 蚕种孵化齐一,是蚕儿体质强壮的标志,收蚁时,如孵化不齐,蚁蚕大小不匀,头大尾小,吐丝多,向蚕座四周乱爬等。说明体质有问题,要检查分析原因。
饲育过程中注意观察蚕的活动状态。健康蚕身体一般比较结实,眠起齐一,眠时头胸部昂起。如眠、起不齐,久久不能入眠,入眠后软弱无力,头胸部平伏,尾部细小者,或出现半蜕皮、不蜕皮蚕等,这些都是体弱或发病的征兆,应加强观察。
如发现蚕体肥大,经过仍属齐一,但病蚕不断发生的情况,可能是受叶质的影响而造成的。在高温多湿条件下,给予日照不足或偏施氮肥的桑叶时,容易发生以上情况。
3、食桑及活动性 饲育中应注意蚕食桑的快慢及活动性。健康蚕一般食欲正常,活动性强(与品种有关)。如发现蚕食欲减退,在正常给桑的情况下,蚕座剩桑多,蚕行动呆滞,头胸部昂起,蛰伏于蚕座或残桑中,或给桑后爬上桑叶面静止不动,则多属体质虚弱或发病的征兆。
4、蚕粪的形状和硬度 不同时期的蚕粪,保持一定的形状和硬度,除熟蚕外健康蚕排出的蚕粪有固定的形状而且比较坚实。若发现蚕粪形状异常,如排软粪而黏结于尾部,或者排念珠状粪及污液者都是发病的症状。
检视时可拾取蚕粪,观察其软硬、色泽及形状加以判断,并根据以上的表现,可及时发现病情,采取相应措施,加以防治。
(二)、正确诊断
抽取发育迟缓或出现可疑症状者进行检查。如青头蚕、迟眠、迟起蚕,半蜕皮、煌善げ希淮渭肽诘乃烙肌⒙阌肌⑼憾昙叭岫甑取?/p>
蚕病的诊断可用肉眼鉴定、显微镜检查、生物鉴定及生化分析等。
1、肉眼鉴定 肉眼诊断主要观察群体发育、蚕的行动、体形、体色、体态、病斑、脉搏、吐液及 排粪等外观的症状。同时,对血液、消化管、丝腺等组织器官的病变进行观察。为了提高肉眼诊断的准确性,应抓住各种蚕病的特异性病症及病变。例如,体色乳白,体躯肿胀,行动狂燥,血液乳白呈脓汁状者,可诊断为血液型脓病;胸部透明,排出带有乳白色黏液的蚕粪,中肠后半部出现乳白色横皱者,可诊断为中肠型脓病;如出现空头的症状,体色带黄发亮,中肠充满黄褐色污液者,可大体诊断为病毒性软化病;尸体头部向前伸出,手触略有弹性,不久渐次变僵者,可诊断为僵病;丝腺有乳白色脓胞状小点者,可诊断为微粒子病;胸部膨大,苦闷、吐液,体躯缩短,痉挛,倒卧于蚕座者,可诊断为中毒症。对于一些病蚕的肉眼诊断未能确定者,可作显微镜检查。
2、显微镜检查 显微镜检查,通常检查粪便、消化液、血液及消化管壁等组织。为了准确诊断,要结合症状及病原体互相验证。检查的次序,要尽量保持病蚕的完好,依次检查蚕粪、消化液及血液后再解剖蚕体,检查内部组织器官。
(1)粪便检查 取病蚕粪加水研磨,以上层清液制成临时标本,用显微镜(450-600倍)观察,可直接检出病原微生物。如见大量多角体,可诊断为中肠型脓病;如见椭圆形的淡绿色、折光性强的孢子,可诊断为微粒子病。
(2)消化液检查 取有食欲的蚕,用手挤压其胸部取出消化液,制成临时标本,进行镜检。如见有多角体者,可确诊为质型多角体病。
(3)血液检查 用针穿刺或剪开尾角取蚕血液,制成临时标本。如血液混浊,镜检有多角体者,可诊断为核型多角体病;见有豆荚状或长圆筒型的芽生孢子存在时,可诊断为绿僵病、白僵病或其他僵病;如见有淡绿色、折光性强的椭圆形孢子者,即可诊断为微粒子病;细菌性败血病蚕在未死前采血液镜检,可见大量细菌存在,但尸体腐败后则不宜作显微镜检查。
(4)组织及尸体检查 上述检查仍未能确诊时,可进行组织病变或尸体检查。如质型多角体病可取中肠后部少许组织作成压片,可直接镜检到大量多角体,如病毒性软化病可检查中肠A、B型球状体等。在上述有关章节已有所叙述;如怀疑是细菌性中毒病,则应把病蚕尸体培养24h后镜检,在检液中发现大量含有伴孢晶体的孢子囊或游离的伴孢晶体和芽孢,可诊断为本病。对尸体的检查,要观察其形态,软硬,变色情况,结合显微镜检查病原微生物相对比。
3、生物学鉴定 如病毒性软化病及胃肠性软化病,可通过病蚕中肠提取液添食于蚁蚕,检查其致病的结果,供作诊断的依据。细菌性中毒病的病原菌及毒素也可以通过生物鉴定来帮助确诊,但被检对象必须要培养48h后检测方可获满意结果。
4、常规诊断、鉴定技术的发展
随着科学技术的迅猛发展,诊断、鉴定方法向着快速、准确、简便和微量的方向发展。
(1)染色和显微技术 建立新的染色法,发展了电镜技术,放大倍数已由光学显微镜的1000倍左右提高到120万倍,还发展了暗视野、相差和荧光等特殊用途的显微镜。新的染色方法(如核酸特异染色、锇酸染色、荧光染色)与显微技术的结合发展,使之不仅能够观察病原体的外部形态,还能观察到寄主细胞及病原体的内部超微结构,从而拓宽了观察范围,提高了观察精度。
(2)血清学方法 向简单、快速、高敏感和高特异性方向发展,如对流免疫电泳、凝胶双向扩散、碳素凝集反应、免疫酶技术、荧光抗体法、单克隆抗体法等均有较快发展,相应于这些方法,开发了标准化的试剂盒,使得人们用来更为方便。
(3)分子生物学技术的诊断、鉴定方法 在诊断、鉴定工作中发展了许多特定的快速鉴定技术,如核酸探针技术和DNA扩增技术等。这些技术都具有快速、灵敏和特异性强的特点,既可提高检测速度,又可提高检测精度和准确性。
① 核酸探针技术 核酸探针是指带有标记的特异DNA片段,当采用已知基因做探针时,也叫做基因探针。经过变性处理后,在适当条件下,该片段可以与待检样品中与其互补的DNA杂交。由于探针DNA具有特异性,如果能杂交,就表明该样品中存在目标病原体。标记是指在探针DNA片段中掺入放射性同位素或生物素等化合物,在杂交后,标记物可以通过放射自显影或酶促反应,将杂交分子显示出来。
② DNA聚合酶链反应(PCR) PCR技术是一种模拟生物体的天然DNA复制的过程,在体外通过DNA聚合酶将特定的DNA不失真地大量扩增的技术。经扩增后的PCR产物可以用凝胶电泳检测,也可以用斑点杂交,Southen印迹杂交方法等检测。在病毒病的预知检查,微粒子病原的鉴定等已有研究开发。
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